Для определения резус-фактора цоликлонами используется нативная («живая») кровь, в том числе из пальца. Исследуемый образец анализируется в течение 10 — 15 минут после забора. Кровь стабилизируется с помощью консервантов. Пробы крови не содержат антикоагулянтов. Чтобы получить максимально выраженную реакцию агглютинации, необходимо использовать высокую концентрацию эритроцитов. Оптимальная температура исследования составляет 37 °С, рекомендуется применять подогретую пластинку.
Подведение итогов исследования рекомендуется проводить не ранее, чем через три минуты. Это обусловлено тем, что реакция агглютинации с имеющими антиген Du эритроцитами наступает медленнее.
Оценка полученных результатов
- Агглютинация отсутствует. Это говорит о том, что кровь является резус-отрицательной, и антиген D на поверхности красных кровяных телец не представлен.
- Агглютинация наблюдается. Это говорит о том, что кровь является резус положительной, и исследуемые эритроциты имеют антиген D.
- Агглютинация слабо выражена. Это свидетельствует о том, что на эритроцитах может присутствовать слабый антиген D — Du. С целью уточнения результата в непрямой пробе Кумбса (в непрямом антиглобулиновом тесте) проводится исследование фенотипа эритроцитов. Для постановки реакции используются IgG (неполные) анти-D-антитела.
Полученные в ходе реакции результаты необходимо записать в специальный журнал и донорскую карту сразу после проведения исследования.
Реагент анти-D IgG
Моноклональный реагент, цоликлон Анти-D IgG используется для определения слабых форм антигена D (Du) на втором этапе исследования реакций конглютинации в пробирочном тесте с желатином.
Одновременно с проведением исследования проводится постановка трех контрольных проб:
- со стандартными резус-отрицательными эритроцитами;
- со стандартными резус-положительными эритроцитами;
- с раствором желатина и исследуемыми эритроцитами, но без анти-D-антител.
В случае, когда присутствует агглютинация эритроцитов, можно говорить о наличии антигена D. При наступлении ярко выраженной агглютинации в образце крови, признанной, согласно результатам исследования, проведенного с помощью анти-D IgM моноклональных антитител, резус-отрицательной, необходимо сделать заключение о наличии антигена Du. Если установлен факт мелкопесочной нечеткой агглютинации, тестирование крови следует провести дополнительно в непрямом антиглобулиновом тесте.
Наряду с цоликлонами аналогичным образом можно применять стандартные аллоиммунные сыворотки, которые содержат неполные анти-D-антитела.
Если при проведении контрольных проб получены неадекватные результаты, необходимо провести повторное исследование по определению резус-фактора цоликлонами www.sangvitest.ru/opredelenie-rezus-faktora-coliklonami/. Рекомендуется использовать при этом другие образцы желатина или другой набор реагентов. Существуют основания для того чтобы предположить наличие антиэритроцитарных адсорбированных антител анти-резус либо другой специфичности на поверхности красных кровяных телец при агглютинации желатином изучаемых образцов крови без добавления анти-D-антител.